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常规服务 >> Western blot服务
提供蛋白抽提、定量、曝光显影、数据分析等服务(服务编号:TS011)

原理:
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测,可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
免疫印迹实验流程:
◎细胞及组织蛋白质抽提;
◎蛋白质定量;
◎变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE);
◎蛋白质转膜;
◎膜的封闭;
一抗二抗孵育;
◎结果检测:化学发光法检测,X 胶片曝光显影;
◎数据分析;
实验要求:
1.客户需自备一抗(建议使用本公司抗体)。如需提供检测样本的请提前电话沟通。
2.标本尽可能新鲜;标本量:组织块大于100mg;细胞数大于1×106。

样品要求:
采集新鲜组织,离体时间尽量不超过15分钟,用锡箔纸包埋或者放入冻存管中,先放入液氮中速冻几个小时或者过夜,再放入-80度冰箱或液氮保存。细胞样品:
1 贴壁细胞:取大约1*107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体,加入适量的PBS悬浮细胞,转入离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入液氮中速冻,然后转入-80度冰箱保存。
2 悬浮细胞:离心收集细胞,弃去培养液,加入适量PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入液氮中速冻,然后转入-80度冰箱保存。

服务收费

服务项目

内容说明

价格

周期

蛋白抽提

总蛋白

¥60/样品

1周

核浆蛋白分开

¥120/样品

1周

蛋白定量

提供蛋白测定总蛋白浓度

¥60/样品

1周

Western Blot预实验

Western Blot 检测一抗体特异性

¥300/目的蛋白

1周

Western Blot

Western Blot 标准服务(包括蛋白质提取和定量,Tubulin标定,不含一抗)

¥1000/目的蛋白·膜

2-3周

SDS-PAGE

客户提供蛋白样品

¥100/组

1-2周

服务流程及时间:
1 委托人及单位提前来电详谈具体实验研究及实验样品有关信息(如:样本来源、类型、数量,抗体来源等)。
2 客户自行下载并签订(Western blot技术服务委托书)并通过传真或E-mail发给我们,同时委托方必须一次性付清我公司技术服务全款费用。
3 根据难易程度和实验工作量的情况,双方协定实验周期,我公司遵守《合同》保质保量准时完成委托实验,并根据要求将扫描图片、分析结果及完整的实验报告方便快捷的送到您的手中。

实验举例:

           

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