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技术研发 >> 蛋白定制服务
原核蛋白表达(服务编号:TS001)

一  简介

卡瑞诺生物拥有多年的原核蛋白表达经验,制备了大量的高活性高纯度蛋白,为用户解决了诸如克隆不成功、载体构建不成功、难表达、可溶性表达低、纯化纯度低等很多难题,得到了用户的一致认可,为您提供高活性高纯度的蛋白是我们的服务目标。

二 服务内容
1、客户提出目的和要求,可由我们提供模版、设计引物、克隆、表达条件的优化、纯化,蛋白活性鉴定等服务;

2、客户提供cDNA序列(或者含目的基因片段的质粒)和实验目的,由我们选择和设计最优的实验方案和确定最适的纯化介质;

3、客户提供已构建的原核表达菌株及相关资料,我们利用公司成熟稳定的蛋白纯化系统进行表达条件优化并纯化目标蛋白;

4、原核蛋白表达及纯化小试,适合硕博士论文、职称论文等科研研究者或新药开发的前期研究者,主要是以获得蛋白蛋白表达和纯化条件及少量纯化蛋白用于后续的小动物或者细胞水平的实验;

5、大量蛋白制备服务:适合工业化及对蛋白量需求大的客户;

6、纯化介质丰富多样,能提供GST纯化(例如pGEX系列载体),His标签纯化(例如pET系列、pQE系列载体)。

三 服务项目及收费标准

服务项目

内容

交付内容

时间/价格

全基因合成

从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。 提供模板,设计合成引物,构建T载体,构建克隆菌。

T载体菌株及测序报告

3周/2800元

基因亚克隆

构建表达载体,选择PET、PGEX等合适载体。

表达载体及测序报告

3周/1500元

E. coli 表达菌株转化及筛选

抽提构建好的表达质转化到高效的DH5α, BL21 (DE3)、Rosetta(DE3)等中,筛选出合适菌株。

重组质粒的表达菌株及表达检测报告

2-3周/1200元

目标蛋白表达及纯化

对时间,、温度、IPTG浓度等进行优化。摇适量菌液,亲和纯化,通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量,WB法验证蛋白正确性。

纯化好的目标蛋白10mg及纯化报告。纯度最高可达95%以上

2-3周/2500元

蛋白的再加工及检测

对生物活性要求较高的纯化后蛋白产品进行复性研究,冻干等进一步加工。

加工后的终产品及相关实验和检测报告

2-3周/协商

大规模制备

按照小试工艺放大生产,制备需要的蛋白产品。

目标蛋白及服务报告

协商

四 服务流程

1 委托方提前来电详谈具体实验要求(如模板选择、载体选择、表达蛋白量等);

2 客户自行下载并签订(原核蛋白表达服务合同书bacteria-protein-expression-contract.rar

3 交付时间和交付内容按选择项目提供。如遇碱基突变等情况交付时间会有一定延长。

五 实验举例

                            

       PCR产物                       质粒双酶切                     蛋白纯化

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